妊娠诊断是母猪繁殖管理上的一项重要内容。配种后,应尽早检出空怀母猪,及时补配,防止空怀。这对于保胎,缩短胎次间隔,提高繁殖力和经济效益具有重要意义。母猪早期妊娠诊断技术方面的研究很多,笔者在此将近年来较成熟、简便,并具有实际应用价值的早期妊娠诊断技术综述如下。
一、超声诊断法
超声诊断法是利用超声波的物理特性,将其和动物组织结构的声学特点密切结合的一种物理学诊断法。其原理是利用孕体对超声波的反射来探知胚胎的存在、胎动、胎儿心音和胎儿脉搏等情况来进行妊娠诊断。目前用于妊娠诊断的超声诊断仪主要有A型、B型和D型。
1 B型超声诊断仪:B型超声诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。具有时间早、速度快、准确率高等优点,但价格昂贵、体积大,只适用于大型猪场定期检查。
2 多普勒超声诊断仪(D型):该仪器可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期诊断。张寿利用北京产SCD-Ⅱ型兽用超声多普勒仪对配种后15~60天母猪检测,认为51~60天准确率可达100%。
3 A型超声诊断仪:这种仪器体积较小,如手电筒大,操作简便,几秒钟便可得出结果,适合基层猪场使用。据报道,这种仪器准确率在75%~80%。笔者用美国产PREG-TONEⅡPLUS仪对177头次母猪进行检测,结果表明,母猪配种后,随着妊娠时间增长,诊断准确率逐渐提高,18~20天时,总准确率和阳性准确率分别为61.54%和62.50%,而在30天时分别提高到82.5%和80.00%,75天时都达到95.65%。
二、激素反应观察法
1 孕马血清促性腺激素(PMSG)法:母猪妊娠后有许多功能性黄体,抑制卵巢上卵泡发育。功能性黄体分泌孕酮,可抵消外源性PMSG和雌激素的生理反应,母猪不表现发情即可判为妊娠。方法是于配种后14~26天的不同时期,在被检母猪颈部注射700IU的PMSG制剂,以判定妊娠母猪并检出妊娠母猪。判断标准:以被检母猪用PMSG处理,5天内不发情或发情微弱及不接受交配者判定为妊娠;5天内出现正常发情,并接受公猪交配者判定为未妊娠。渊锡藩等所得结果为,在5天内妊娠与未妊娠母猪的确诊率均为100%。且认为该法不会造成母猪流产,母猪产仔数及仔猪发育均正常,具有早期妊娠诊断和诱导发情的双重效果。
2 已烯雌酚法:对配种16~18天母猪,肌肉注射已烯雌酚1毫升或0.5%丙酸已烯雌本分和丙酸睾丸酮各0.22毫升的混合液,如注射后2~3天无发情表现,说明已经妊娠。
3 人绝经期促性腺激素(HMG)法:HMG是绝经后妇女尿中提取的一种激素,主要作用与PMSG相同。据报道,使用南京农业大学生产的母猪妊娠诊断液,在广东数个猪场试用1000胎次,诊断准确率达100%。
三、尿液检查法
1 尿中雌酮诊断法:用2厘米×2厘米×3厘米的软泡沫塑料,拴上棉线作阴道塞。检测时从阴道内取出,用一块硫酸纸将泡沫塑料中吸纳的尿液挤出,滴入塑料样品管内,于-20℃贮存待测。尿中雌酮及其结合物经放射免疫测定(RIA),小于20mg/毫升为非妊娠,大于40mg/毫升为妊娠,20~40mg/毫升为不确定。蔡正华等报道其准确率达100%。
2 尿液碘化检查法:在母猪配种10天以后,取其清晨第一次排出的尿放于烧杯中,加入5%碘酊1毫升,摇匀,加热、煮开,若尿液变为红色,即为已怀孕;如为浅黄色或褐绿色说明未孕。本法操作简单,据农丁报道,准确率达98%。
四、血小板计数法
文献报道,血小板显着减少是早孕的一种生理反应,根据血小板是否显着减少就可对配种后数小时至数天内的母畜作出超早期妊娠诊断。该方法具有时间早、操作简单、准确率高等优点。尤其是为胚胎附植前的妊娠诊断开辟了新的途径,易于在生产实践中推广和应用。
在母猪配种当天和配种后第1~11天从耳缘静脉采血20μL置于盛有0.4毫升血小板稀释液的试管内,轻轻摇匀,待红细胞完全破坏后再用吸管吸取一滴充入血细胞计数室内,静置15min后,在高倍镜下进行血小板计数。配种后第7天是进行超早期妊娠诊断的最佳血检时间,此时血小板数降到最低点(250±91.13)×103/立方毫米。试验母猪经过2个月后进行实际妊娠诊断,判定与血小板计数法诊断的妊娠符合率为92.59%,未妊娠符合率83.33%,总符合率93.33%,马群山等试验符合率为89.53%,李玉龙等所得总符合率为93.85%。
该方法虽有时间早、准确率高等优点,但应排除某些疾病所导致的血小板减少。例如,肝硬化、贫血、白血病及原发性血小板减少性紫癜等。
五、其它方法
1 公猪试情法:配种后18~24天,用性欲旺盛的成年公猪试情,若母猪拒绝公猪接近,并在公猪2次试情后3~4天始终不发情,可初步确定为妊娠。
2 阴道检查法:配种10天后,如阴道颜色苍白,并附有浓稠黏液,触之涩而不润,说明已经妊娠。也可观看外阴户,母猪配种后如阴户下联合处逐渐收缩紧闭,且明显地向上翘,说明已经妊娠。
3 直肠检查法:要求为大型的经产母猪。操作者把手伸入直肠,掏出粪便,触摸子宫,妊娠子宫内有羊水,子宫动脉搏动有力,而未妊娠子宫内无羊水,弹性差,子宫动脉搏动很弱,很容易判断是否妊娠。但该法操作者体力消耗大,又必须是大型经产母猪,所以生产中较少采用。
除上述方法外,还有血或乳中孕酮测定法、EPF检测法、红细胞凝集法、掐压腰背部法和子宫颈黏液涂片检查等。母猪早期妊娠诊断方法有很多,它们各有利弊,临床应用时应根据实际情况选用。