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中小规模猪场荧光定量 PCR 检测实验室的配置和有效运行

时间:2022-04-25 02:09:16

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中小规模猪场荧光定量 PCR 检测实验室的配置和有效运行

年 10 月 1 日,本公众号因发《非洲猪瘟玩拔牙,胜算到底有多大?》一文,曾在行业内引起较大争议。为免争议不断升级招惹不必要的是非,本公众号决定把该文删除了。

其实,该文想表达的意思,并不是全盘否认拔牙,而是想强调拔牙解决不了根本性问题。非洲猪瘟请神容易送神难,但凡是瘟神已经进驻的猪场,神仙都没有办法把它送得出去

在已经被病原污染过的猪场,试图通过拔牙实现病原净化使猪场恢复到发病前状态,胜算基本为零。清场都不过是时间问题。仅仅依靠肉眼观察拔牙,不借助仪器检测,或虽使用仪器检测但仪器设备或检测试剂灵敏度达不到应有的技术要求。胜算为零。基于肉眼观察(或借助落后仪器设备或检测试剂)拔牙的结果,与“烂苹果效应”差不多。好好的一箱苹果,因烂掉的舍不得丢,每天捡那些已经烂掉的吃几个,吃到最后,一箱苹果一个也没丢,但每天吃的都是烂水果。同理,好好的一栏猪,每天见发病的清理几个,但因为被感染上并开始向外排毒的疑似病猪没有及时被发现,猪栏中不断有猪在对外排毒,健康猪不断被感染上而变成被感染猪,被感染猪不断发病变成发病猪而被清理,清理到最后,整栏猪基本都被当作病猪补处理掉了。猪场每天都在埋死猪,卖垃圾,老板被逼疯,员工累散架。

生产上,唯一算得上有意义的拔牙,是利用先进的检测手段,在猪刚开始被感染上还未对外排毒之前及时被发现,检出一头把与之有直接接触途径的所有受威胁猪一并拔除,这种方法如果执行到位:

可以有效阻止非洲猪瘟病原在猪群中快速扩散,为猪场有计划清理存栏猪争取时间。在执行非洲猪瘟疫苗免疫的情况下,疫苗免疫接种前预先对待免疫猪群一次性彻底拔牙,疫苗免疫接种后对已免疫猪群持续性拔牙,可以有效阻止病原在免疫猪群中扩散,为尚未被感染上野毒猪逐渐产生对非洲猪瘟的免疫力争取时间。

非洲猪瘟颠覆常人认知!极端情况下,1 个病毒即足以导致一头猪被感染上并最终把整头猪吃死。相应地,如果选用仪器检测玩拔牙,要求样品中只要有 1 个病毒即可准确地被检测得出来。能够满足这个技术要求的仪器设备,除了荧光定量 PCR,没有任何其他仪器设备能够做得到;能够满足这个技术要求的检测试剂,除了个别灵敏度特别高的试剂(如进口 IDEXX 非洲猪瘟病毒荧光定量 PCR 检测试剂),绝大多数的试剂都做不到。

只是,目前在整个养猪行业,荧光定量 PCR 检测技术一直被猪场一线兽医奉为遥不可及的高科技技术,大多数一线兽医(特别是中小规模猪场的一线兽医)之前连听都没听说过。

研制及生产荧光定量 PCR 检测仪器和检测试剂,确实属于高科技,但使用荧光定量 PCR 仪器和试剂做检测,却与高科技扯不上任何关系。5G 网络和手机的研制和生产属于高科技,全世界没几个人会做,但 5G 手机却全世界每个人都会用,连三岁的小孩都会用。

1实验室的基本条件要求

实验室尽量安排在一个远离养猪生产区、开阳通风的位置。如果能够找到三间相互隔开的房间,最好用三个房间,提取 DNA 操作、加样操作和检测操作各占用一个房间。如果找不到三个房间,两个房间也可以,提取DNA操作单独占用一个房间,加样操作和检测操作共用一个房间,两个操作室用隔板隔开。如果连两个房间都找不到,还可以只用一个房间,按下图所示的要求把三个操作室互相隔开。

实验室环境控制的关键,是做好通风和排气。不管是用三个房间、两个房间还是一个房间,每个操作室都要求必须配备独立的排气扇。荧光定量 PCR 检测不是一般的敏感,空气中只要有一个病毒核酸不小心被飘到检测样品中,足以导致样品检测出现假阳性结果。

2仪器设备、耗材和检测试剂

很多人都认为荧光定量 PCR 仪器设备非常昂贵,实际上只要懂得选择自己所需要的,荧光定量 PCR 仪器设备一点都不贵。作为一个中小规模猪场,只需要卖 10 来头猪所得到的钱,按下表所列清单配置一个荧光定量 PCR 检测实验室,即可满足猪场日常生产所需要的所有病原学检测要求。不仅仅是非洲猪瘟病原可以检,其他所有猪传染病病原也都可以检。

按该清单所配备的检测耗材,足够检测 500 个样品;DNA 提取试剂足够提取 250 个样品;非洲猪瘟检测试剂盒足够检测 100 个样品。检测其他传染病病原不需另外再增加购买耗材和试剂的种类,只需购买相应病原专用的 PCR 检测试剂盒即可。

3检测人员素质要求初中或以上文化,如对畜牧兽医专业知识有基本了解更好;最好用女性,卫生习惯好,做事细心不急躁,无完成任务心态和朝九晚五、敷衍塞责倾向。4设备采购和检测人员培训荧光定量 PCR 实验室仪器设备、耗材和检测试剂采购金额虽然不多,但种类非常繁多,采购途径多样,产品质量参差不齐,采购工作非常繁琐。赛普诺养猪技术服务团队,有10 多年从事猪病诊断实验室检测经验和心得,可以为中小规模猪场荧光定量 PCR 检测实验室的配置提供最中肯和最接地气的意见和建议,并可以为中小规模猪场仪器设备、耗材和检测试剂的采购提供一站式打包服务,贵重仪器(荧光定量 PCR 系统和高速冷冻离心机)如出现故障,在积极协助用户联系厂家维修的同时,还可以提供备用机给用户应急使用。如用户有需要,可以派人到现场为用户提供检测人员培训,三至五小时内包教包会。并可常年为用户提供自检测试剂选择、检测结果分析和检测误差(如假阴性,假阳性)控制等检测操作过程中常用的技术问题提供一个悟性较好的新手需要十年八年经验积累才能逐渐悟出(悟性较差人的检测人员可能很难悟出)的技术解决方案。详情咨询:

梁思思,联系电话:157 5001 1936

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